【腫瘤壞死因子α（TNF-α）簡介】：由中性粒細胞、活化的淋巴細胞、巨噬細胞、NK細胞、LAK細胞、星形膠質(zhì)細胞內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞和一些轉(zhuǎn)化細胞產(chǎn)生。自然發(fā)生的TNF-α形式是糖基化的，但非糖基化的重組TNF-α具有相當?shù)纳锘钚?。?jù)報道，TNF-α的生物活性原生形式是一個三聚體。

【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測細胞液、體液、組織、血清、血漿等標本中雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)的含量。凡訂購我司任意一款試劑盒均享受免費代測服務，歡迎咨詢、訂購！

實驗材料與試劑配制：

1.  儀器與材料：酶標儀（使用前預熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。

2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

樣品收集、處理及保存：雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA檢測試劑盒

【細胞培養(yǎng)上清】：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

【血清】：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。

【血漿】：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

【體液】：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

【樣本要求】：樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

【樣本保存】：如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-80 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA檢測試劑盒性能：

【準確性】：標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值，大于等于0.9900。

【檢測范圍】：請咨詢我司銷售人員領取說明書

【靈敏度】：zui低檢測濃度小于1.0pg/ML

【特異性】：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應

【重復性】：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%

洗板方法：

1.  手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。

2.  自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

技術小提示：

1.      當混合或重溶蛋白溶液時，盡量避免起沫。

2.      為了避免交叉感染，配置不同濃度標準品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。

3.      每次孵育時，請正確使用封板膠可保證結(jié)果的準確性。

4.      混合后的顯色底物在上板前應為無色，請避光保存；假如微孔板后，將由物色變成不同深度的藍色。

5.      終止液上板順序應同顯色底物上板順序一致；加入終止液后，孔內(nèi)顏色由藍變黃；若孔內(nèi)有綠色，則表明孔內(nèi)液體未混勻；請充分混合。

上海軒澤康生物ELISA試劑盒種類繁多，根據(jù)產(chǎn)品名稱原理大致分為間接法、夾心法、競爭法、捕獲包被法（也稱為反向間接法，比較少見）。其中各類型試劑盒的基本原理可電詢我司業(yè)務人員進行詳細了解。以下是關于各類型ELISA試劑盒及適用類型：

①間接法：測定總抗體或IgG抗體

②抗體夾心法：測定二價或二價以上大分子抗原

③抗原夾心法：測定抗體

④抗體競爭法：測定抗體

⑤抗原競爭法：測定只有一個抗原決定簇的小分子半抗原

⑥捕獲包被法：測定IgM,傳染病的早期診斷

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